Proliferare si diferentiere celulara

DOWNLOAD REFERAT

Preview referat: Proliferare si diferentiere celulara

Dupa tipul de material biologic cultivat se disting doua mari categorii de culturi: 1. Culturi de organe (organocultura) - reprezinta intretinerea, de obicei fara multiplicare, in medii nutritive adecvate a unor fragmente de organ (intestin, trahee, rinichi).
In general, cultura de organe "in vitro" este dificila si necesita medii nutritive complexe si conditii tehnice speciale.
2. Culturi de celule - reprezinta multiplicarea "in vitro" a celulelor din:

-fragmente de tesut (explante); in jurul explantului se formeaza o coroana de celule care se multiplica;
-suspensii de celule naturale sau obtinute prin dispersarea in laborator. In prezent, se pot obtine culturi celulare in linie continua, mentinute de-a lungul a 15-20 de pasaje fara a se transforma sau degenera, precum si linii celulare stabilizate, care isi mentin nealterati parametrii morfologici si fiziologiei initiali dupa multiple diviziuni. Clonarea reprezinta separarea unei singure celule si multiplicare a ei separata rezultand o linie celulara uniforma din punct de vedere genetic.

In organism, celulele se gasesc sub influenta mecanismelor de conservare si control. Odata scoasa din mediul natural de viata, celula are nevoie, pentru a supravietui si a se multiplica "in vitro", de o serie de conditii de ordin fizic, chimic, bioenergetic care sa mimeze cat mai mult situatia "in vivo". b. Dispersarea mecanica (maruntirea embrionului) se realizeaza intr-un mediu steril, cu ajutorul unui foarfece special.

Daca nu se obtin rezultate satisfacatoare, fragmentele rezultate sunt supuse dispersarii chimice cu tripsina la 37ºC, pe suprafata unui agitator magnetic. Actiunea tripsinei se opreste prin racirea solutiei si apoi celulele se separa de solutia de tripsina prin centrifugare si se inlatura supenatantul reprezentat de tripsina.
Se resuspenda sedimentul celular intr-un mediu nutritiv, apoi se prepara o dilutie 1:10 a suspensiei celulare in mediu nutritiv pentru efectuarea numararii. « mai multe referate din Biologie