Metoda Elisa

5x puncte

categorie: Biologie

nota: 8.80

nivel: Facultate

Referat despre Metoda Elisa
Elisa e o tehnica biochimica utilizata special in imunologie pentru a detecta prezenta unui anticorp ori a unei antigene intro celula. Se folosesc 2 anticorpi:
1. Unul e specific antigenei
2. Celalalt reactioneaza cu complexul antigen-anticorp si e cuplat la o enzima.
Acesta poate cauza un strat cromogenic sau fluorogenic pentru a produce un [...]
DOWNLOAD REFERAT

Preview referat: Metoda Elisa

Referat despre Metoda Elisa
Elisa e o tehnica biochimica utilizata special in imunologie pentru a detecta prezenta unui anticorp ori a unei antigene intro celula. Se folosesc 2 anticorpi:
1. Unul e specific antigenei
2. Celalalt reactioneaza cu complexul antigen-anticorp si e cuplat la o enzima.
Acesta poate cauza un strat cromogenic sau fluorogenic pentru a produce un semnal.

Utilizarea testului Elisa
Testul standard pentru a detecta anticorpii HIV in sange este reprezentat de Elisa (enzyme-linked-immunosorbent-assay)

O proba de sange este combinata cu proteine ale virusului HIV. Daca sangele cuntine anticorpi HIV acestia ataca proteinele HIV producand o schimbare de culoare in mixtura.

Testul este de mare incredere cand este efectuat la 2-3 luni de la infectie si mai putin sigur cand este efectuat in stadiul incipient al infectiei, inainte ca anticorpii sa aiba o sansa sa se formeze.

Pentru a se confirma rezultatul pozitiv al testului Elisa se efectueaza testul Western Blot care poate detecta stadii incipiente ale anticorpilor HIV.

Combinatia intre cele doua teste are o precizie de peste 99.9 % in detectarea infectiei cu HIV.

Testul isi gaseste intrebuintare in industria alimentara in detectarea alergiilor provocate de : lapte, alune, migdale sau oua.

Etape generale, indirecte elisa pentru determinarea concentratiei serumului anticorp
1 Particulele de antigena, se aplica pe o "farfurie microtitrata". Antigena este fixata pe suprafata farfuriei pentru a ramane imobila .

2 Pe suprafata farfuriei se adauga mostre de serum al unei concentratii necunoscute de anticorpi, de obicei diluat intr-un alt tip de serum. Absenta serului uman previne antibiotici non specifici din sangele pacientului.

3 "Farfuria" este spalata astfel anticorpii sunt indepartati. Dupa aceasta spalare complexul ramane atasat preparatului.

4 Doar complexul antigena-anticorp este adaugat preparatului. Aceasta a doua serie de anticorpi este cuplata enzimei substratului modificat.

5 Se respala preparatul pentru departarea excesului de anticorpi.

6 Se aplica un substrat transformat de o enzima pt a cauza un semnal cromogenic sau fluorogenic.

7 Rezultatele sunt citite cu ajutorul spectrofotometrului.

Metoda simpla
1 Anticorpii "nelipiti" sunt incubati in prezenta antigenei.

2 Aceste complexe ale anticorpilor sunt apoi adaugate antigenei pe preparat.

3 Farfuria e spalata astfel incat anticorpii in plus sunt indepartati.

4 Al doilea anticorp, specific anticorpilor primari este adaugat. Acest al doilea este cuplat enzimelor.

5 Un substrat este adaugat si enzimele ramase produc un semnal cromogenic si fluorescent.

Sandwich elisa
1 Farfuriei i se adauga un substrat de anticorpi

2 Mostra este adaugata si orice antigena prezenta la prinderea anticorpilor

3 Detectorul anticorpilor este adaugat

4 Enzimele celui de-al doilea anticorp este adaugat, si este acoperit de enzimele care detecteaza formele.
DOWNLOAD REFERAT
« mai multe referate din Biologie

CAUTA REFERAT

TRIMITE REFERAT CERE REFERAT
Referatele si lucrarile oferite de E-referate.ro au scop educativ si orientativ pentru cercetare academica.