Proprietatile proteinelor

DOWNLOAD REFERAT

Preview referat: Proprietatile proteinelor

Datorita prezentei unei multitudini de grupe functionale libere ionizabile in structura macromoleculelor proteice (-COO-, -NH3+, -S- etc.), solutiile proteinelor prezinta un caracter amfoter. Pe aceasta proprietate se bazeaza si rolul de sistem tampon pe care proteinele solubilizate in diferite lichide biologice il indeplinesc alaturi de sistemul tampon carbonat-bicarbonat, sistemul tampon al aminoacizilor, al hemoglobinei si altele.

Ca si in cazul aminoacizilor, datorita prezentei grupelor functionale ionizate in moleculele proteinelor, acestea se caracterizeaza prin valori bine determinare ale punctului lor izoelectric (sau pH izoelectric - pI sau pHi) care se defineste ca fiind acea valoare de pH la care incarcarea electrica globala a moleculei este nula.

Acest parametru fizico-chimic prezinta o importanta practica deosebita, el stand la baza metodelor electroforetice de separare si determinare a diferitelor fractiuni proteice din lichidele biologice. Valorile punctelor izoelectrice ale proteinelor oscileaza intre limite foarte largi si nu depind de masa lor moleculara (tabelul II).

In structura tuturor proteinelor solubile aflate in mediu apos pot ioniza grupele -NH2 terminale si grupele -COOH terminale. In afara de acestea, exista 7 aminoacizi ale caror resturi pot ioniza chiar si atunci cand se situeaza in interiorul catenelor polipeptidice.

Hidroliza proteinelor si peptidelor naturale. Analiza compozitiei in aminoacizi a unei proteine native sau a unei peptide naturale este deosebit de importanta pentru studiul structurii chimice a acestora. Totodata, ea pune multe probleme printre care, cea mai importanta o constituie puritatea materialului folosit pentru analiza.

Acest material nu trebuie sa fie impurificat cu substante cu masa moleculara mica (saruri utilizate la purificare, lipide, glucide, ioni metalici etc.). Gruparile prostetice ale heteroproteinelor se separa de componentele proteice inainte de a se trece la hidroliza acestora din urma. In functie de modul de realizare, hidroliza peptidelor si proteinelor este de mai multe tipuri.

1. Hidroliza acida. Proteina supusa analizei este liofilizata si redizolvata in solutie de HCl 5,7 N la care se adauga cateva picaturi de fenol 5%. In fiola in care a fost realizat amestecul de hidroliza se introduce azot sau se creeaza vid pentru a preintampina oxidarea, dupa care se incalzeste pe baia de apa la 40ºC timp de 30 de secunde sub agitare usoara, pentru indepartarea completa a oxigenului.

Se realizeaza apoi hidroliza la 105 - 110ºC in fiola din sticla termorezistenta timp de 24 - 72 de ore dupa care fiola se raceste, iar acidul este indepartat la rotavapor. Reziduul obtinut se redizolva intr-un volum minim de apa bidistilata si se evapora din nou la sec. « mai multe referate din Biologie