Metoda Elisa

5x puncte

categorie: Biologie

nota: 8.80

nivel: Facultate

Referat despre Metoda Elisa
Elisa e o tehnica biochimica utilizata special in imunologie pentru a detecta prezenta unui anticorp ori a unei antigene intro celula. Se folosesc 2 anticorpi:
1. Unul e specific antigenei
2. Celalalt reactioneaza cu complexul antigen-anticorp si e cuplat la o enzima.
Acesta poate cauza un strat cromogenic sau fluorogenic pentru a produce un [...]
DOWNLOAD REFERAT

Preview referat: Metoda Elisa

Referat despre Metoda Elisa
Elisa e o tehnica biochimica utilizata special in imunologie pentru a detecta prezenta unui anticorp ori a unei antigene intro celula. Se folosesc 2 anticorpi:
1. Unul e specific antigenei
2. Celalalt reactioneaza cu complexul antigen-anticorp si e cuplat la o enzima.
Acesta poate cauza un strat cromogenic sau fluorogenic pentru a produce un semnal.

Utilizarea testului Elisa
Testul standard pentru a detecta anticorpii HIV in sange este reprezentat de Elisa (enzyme-linked-immunosorbent-assay)

O proba de sange este combinata cu proteine ale virusului HIV. Daca sangele cuntine anticorpi HIV acestia ataca proteinele HIV producand o schimbare de culoare in mixtura.

Testul este de mare incredere cand este efectuat la 2-3 luni de la infectie si mai putin sigur cand este efectuat in stadiul incipient al infectiei, inainte ca anticorpii sa aiba o sansa sa se formeze.

Pentru a se confirma rezultatul pozitiv al testului Elisa se efectueaza testul Western Blot care poate detecta stadii incipiente ale anticorpilor HIV.

Combinatia intre cele doua teste are o precizie de peste 99.9 % in detectarea infectiei cu HIV.

Testul isi gaseste intrebuintare in industria alimentara in detectarea alergiilor provocate de : lapte, alune, migdale sau oua.

Etape generale, indirecte elisa pentru determinarea concentratiei serumului anticorp
1 Particulele de antigena, se aplica pe o "farfurie microtitrata". Antigena este fixata pe suprafata farfuriei pentru a ramane imobila .

2 Pe suprafata farfuriei se adauga mostre de serum al unei concentratii necunoscute de anticorpi, de obicei diluat intr-un alt tip de serum. Absenta serului uman previne antibiotici non specifici din sangele pacientului.

3 "Farfuria" este spalata astfel anticorpii sunt indepartati. Dupa aceasta spalare complexul ramane atasat preparatului.

4 Doar complexul antigena-anticorp este adaugat preparatului. Aceasta a doua serie de anticorpi este cuplata enzimei substratului modificat.

5 Se respala preparatul pentru departarea excesului de anticorpi.

6 Se aplica un substrat transformat de o enzima pt a cauza un semnal cromogenic sau fluorogenic.

7 Rezultatele sunt citite cu ajutorul spectrofotometrului.

Metoda simpla
1 Anticorpii "nelipiti" sunt incubati in prezenta antigenei.

2 Aceste complexe ale anticorpilor sunt apoi adaugate antigenei pe preparat.

3 Farfuria e spalata astfel incat anticorpii in plus sunt indepartati.

4 Al doilea anticorp, specific anticorpilor primari este adaugat. Acest al doilea este cuplat enzimelor.

5 Un substrat este adaugat si enzimele ramase produc un semnal cromogenic si fluorescent.

Sandwich elisa
1 Farfuriei i se adauga un substrat de anticorpi

2 Mostra este adaugata si orice antigena prezenta la prinderea anticorpilor

3 Detectorul anticorpilor este adaugat

4 Enzimele celui de-al doilea anticorp este adaugat, si este acoperit de enzimele care detecteaza formele.
DOWNLOAD REFERAT
« mai multe referate din Biologie

CAUTA REFERAT

TRIMITE REFERAT CERE REFERAT
Referatele si lucrarile oferite de E-referate.ro au scop educativ si orientativ pentru cercetare academica.
Confidentialitatea ta este importanta pentru noi

E-referate.ro utilizeaza fisiere de tip cookie pentru a personaliza si imbunatati experienta ta pe Website-ul nostru. Te informam ca ne-am actualizat termenii si conditiile de utilizare pentru a integra cele mai recente modificari privind protectia persoanelor fizice in ceea ce priveste prelucrarea datelor cu caracter personal. Inainte de a continua navigarea pe Website-ul nostru te rugam sa aloci timpul necesar pentru a citi si intelege continutul Politicii de Cookie. Prin continuarea navigarii pe Website-ul nostru confirmi acceptarea utilizarii fisierelor de tip cookie conform Politicii de Cookie. Nu uita totusi ca poti modifica in orice moment setarile acestor fisiere cookie urmarind instructiunile din Politica de Cookie.


Politica de Cookie
Am inteles